ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ .................................................................... 5
ВВЕДЕНИЕ (АННОТАЦИЯ ДОКТОРСКОЙ ДИССЕРТАЦИИ (DSC)) .......... 6
ГЛАВА I. ИОННЫЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ ОБЪЕМА
ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК.................................................................................. 17
§1.1. Тимус и механизм созревания Т-лимфоцитов .................................... 17
§1.2. Общие принципы и механизмы регуляции объёма клеток ............... 23
§1.3. Система регуляции объема Т-лимфоцитов ......................................... 26
§1.4. Общая характеристика анионных каналов.......................................... 34
§1.5. ClC-2: канал небольшой проводимости внутреннего выпрямления.36
§1.6. Макси-анионный канал ......................................................................... 38
§1.7. Объем-зависимый анионный канал...................................................... 44
§1.8. Заключение к главе I.............................................................................. 47
ГЛАВА II. ОПИСАНИЕ ОСНОВНЫХ МАТЕРИАЛОВ И МЕТОДОВ,
ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ РЕГУЛЯЦИИ ОБЪЕМА
КЛЕТОК И АКТИВНОСТИ ИОННЫХ КАНАЛОВ ......................................... 49
§2.1. Описание растворов, использованных в исследовании регуляции
клеточного объема .......................................................................................... 49
§2.2. Описание растворов, использованных в экспериментах по
микролокальному отведению ионных токов (пэтч-кламп) ........................ 52
§2.3. Описание методов получения лимфоцитов из тимуса крыс и мышей
........................................................................................................................... 54
§2.4. Описание клеточных линий, использованных в экспериментах пэтчкламп................................................................................................................. 56
§2.5. Определение жизнеспособности тимоцитов....................................... 57
§2.6. Регистрация объема клеток по светопропусканию ............................ 57
§2.7. Метод микролокального отведения ионных токов (пэтч-кламп). .... 59
§2.8. Получение общего экстракта флавоноидов и определение их
концентрации................................................................................................... 60
3
§2.9. Математическая обработка результатов экспериментов ...................62
ГЛАВА III. ИНГИБИТОРНЫЙ АНАЛИЗ ИОННЫХ МЕХАНИЗМОВ
РЕГУЛЯЦИИ ОБЪЕМА ЛИМФОЦИТОВ ТИМУСА....................................... 64
§3.1. Роль внеклеточных одновалентных катионов в регуляции объема
тимоцитов при гипоосмотическом стрессе ..................................................64
§3.2. Роль внеклеточных двухвалентных катионов в регуляции объема
тимоцитов при гипоосмотическом стрессе ..................................................71
§3.4. Роль систем сопряженного транспорта ионов калия и хлора в
регуляторном уменьшении объема тимоцитов в ответ на
гипоосмотических стресс. ..............................................................................81
§3.5. Обсуждение.............................................................................................84
ГЛАВА IV. БИОФИЗИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ИОННЫХ КАНАЛОВ,
АКТИВИРУЕМЫХ В МЕМБРАНЕ ЛИМФОЦИТОВ ТИМУСА ПРИ
ОСМОТИЧЕСКОМ СТРЕССЕ ............................................................................ 87
§4.1. Кинетика активации макроскопической ионной проводимости
плазматической мембраны тимоцитов в условиях гипоосмотического
стресс ................................................................................................................88
§4.2. Фармакологический профиль макроскопических мембранных токов,
активированных в тимоцитах в ответ на осмотическое набухание клетки
...........................................................................................................................95
§4.3. Биофизические свойства микролокальных (одиночных) ионных
токов, регистрируемых на мембране тимоцитов в условиях осмотического
стресса ............................................................................................................101
§4.4. Обсуждение...........................................................................................115
ГЛАВА V. РОЛЬ ОБЪЕМ-ЗАВИСИМОГО АНИОННОГО ТРАНСПОРТА В
ВЫБРОСЕ ГЛУТАТИОНА ИЗ ТИМОЦИТОВ ПРИ ГИПООСМОТИЧЕСКОМ
СТРЕССЕ.............................................................................................................. 117
§5.1. Роль глутатиона в клеточных процессах и гипотетические пути его
выброса при осмотическом стрессе ............................................................117
4
§5.2. Проницаемость объем-зависимого анионного канала к глутатиону
при замене ионов хлора во внеклеточной среде на ионы глутатиона..... 120
§5.3. Обсуждение........................................................................................... 129
ГЛАВА VI. УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ОЗАК В МУТАНТНЫХ КЛЕТКАХ
L929 ФИБРОСАРКОМЫ, ПОЛУЧЕННЫХ МЕТОДОМ РАНДОМНОГО
МУТАГЕНЕЗА .................................................................................................... 131
ГЛАВА VII. МОДУЛЯЦИЯ СИСТЕМЫ РЕГУЛЯЦИИ КЛЕТОЧНОГО
ОБЪЕМА ТИМОЦИТОВ РАСТИТЕЛЬНЫМИ ЭКСТРАКТАМИ ............... 140
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. .................................................................................................. 148
ВЫВОДЫ............................................................................................................. 151
СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ................................................ 154
