Қисқартмалар рўйхати...............................................................................................5
Кириш..........................................................................................................................7
I БОБ. АДАБИЁТЛАР ШАРҲИ..........................................................................14
1.1. Микроорганизмлардан ажратилган липолитик ферментлар.........................14
1.2. Биокатализ жараёнлари учун липазалар олиш...............................................15
1.3.Pseudomonas оиласи бактерияларидан липаза ажратиб олиш, физиккимёвий хусусиятлари ва бирламчи тузилишини аниқлаш.................................17
1.4. Иммобиллаш асосида аффин сорбентлар синтез қилиш..............................35
II БОБ. ОЛИНГАН НАТИЖАЛАР ВА УЛАРНИНГ МУҲОКАМАСИ......41
2.1. Pseudomonas aeruginosa А12 бактериясининг ўстириш шарт-шароитларини
мақбуллаштириш ва культурал суюқликда липаза ферментининг ҳосил бўлиш
динамикасини ўрганиш............................................................................................41
2.2. Pseudomonas aeruginosa А12 бактерияси культурал суюқлигидан липаза
ферментини ажратиб олиш, физик-кимёвий хусусиятлари ва бирламчи
тузилишини аниқлаш...............................................................................................44
2.2.1. Pseudomonas aeruginosa А12 бактерияси культурал суюқлигидан липаза
ферментини ажратиб олиш......................................................................................44
2.2.2. Pseudomonas aeruginosa А12 бактерияси культурал суюқлигидан ажратиб
олинган липазанинг физик-кимёвий хусусиятларини ўрганиш..........................47
2.2.3. Pseudomonas aeruginosa А12 бактерияси липазаси бирламчи тузилишини
аниқлаш.....................................................................................................................50
2.3. Ёғ кислоталарининг алкил эфирларини олиш учун липаза иштирокида
аффин сорбентлар синтези......................................................................................57
2.4. Триглицеридларни ёғ кислоталарининг алкил эфирларигача ферментатив
трансэтерификацияланиш шароитларини мақбуллаштириш..............................61
2.5. Ёғ кислота эфирларини глицерин ва реакциянинг қўшимча
маҳсулотларидан тозалаш.......................................................................................68
III БОБ. ТАЖРИБАВИЙ ҚИСМ.........................................................................743
3.1. Материаллар ва асбоб-ускуналар.....................................................................74
3.1.1. Асбоб ва ускуналар........................................................................................74
3.1.2. Сорбентлар......................................................................................................74
3.1.3. Реактивлар.......................................................................................................74
3.2. Услублар.............................................................................................................75
3.2.1. Батерияларни экиш ва ўстириш шароитлари..............................................75
3.2.2. Батерияларни экиш ва ўстиришда биохавфсизлик қоидалари..................75
3.2.3. Липаза фаолликни аниқлаш..........................................................................76
3.2.4. Оқсил миқдорини аниқлаш...........................................................................77
3.2.5. Ион алмашиниш хроматографияси..............................................................77
3.2.6. Гидрофоб хроматографияси..........................................................................77
3.2.7. Оқсилларнинг молекуляр массасини аниқлаш............................................77
3.2.8. Ферментларнинг каталитик хусусиятларини ўрганиш...............................77
3.2.8.1. Липаза фаоллиги ва барқарорлигининг рН га боғлиқлиги......................77
3.2.8.2. Липаза фаоллиги ва барқарорлигининг ҳароратга боғлиқлиги..............78
3.2.9. Липазанинг аминокислота таркибини аниқлаш..........................................78
3.2.10. Липазанинг N-охирги аминокислотасини аниқлаш..................................78
3.2.11. Липазанинг С-охирги аминокислотасини аниқлаш..................................78
3.2.12. Ферментнинг протеом таҳлили...................................................................78
3.2.12.1. Масс-спектрометрия усули учун электофорез гелида оқсилнинг
трипсинолизи ва экстракцияси................................................................................78
3.2.12.2. Масс-спектрометрия.................................................................................79
3.2.13. Липаза ферментининг 3D моделини яратиш.............................................80
3.2.14. Аффин сорбентлар синтези.........................................................................80
3.2.14.1. Матрицани фаоллаштириш......................................................................80
3.2.14.2. Липазани -NH2 гуруҳи орқали иммобиллаш...........................................81
3.2.14.3. Липазани –SH гуруҳи орқали иммобиллаш............................................814
3.2.14.4. Липазани -СООН гуруҳи орқали иммобиллаш......................................81
3.2.14.5. Иммобилланган фермент миқдорини аниқлаш......................................82
3.2.15. Ферментнинг иммобиллангандан кейинги фаоллигини аниқлаш...........82
3.2.16. Сорбентнинг трансэтерификациялаш қобилиятини аниқлаш.................82
3.2.17. Газ хроматографияси...................................................................................83
Хулосалар.................................................................................................................84
Фойдаланилган адабиётлар рўйхати..................................................................85
Иловалар................................................................................................................104
